Verbleib von Antibiotikaresistenzgenen in Kl\u00e4ranlagen<\/p>\n
Verbleib von antibiotikaresistenzgenen in pflanzenkl\u00e4ranlagen.Im Fokus werden Chinolone stehen.<\/p>\n
–\tpraktisches erlernen des betriebs von pflanzenkl\u00e4ranlagen inkl. Messung verschiedener Summenparameter zur Abwassercharakterisierung wie chemischer Sauerstoffbedarf<\/p>\n
-Analyse von Chinolonen in Proben aus Pflanzenklaranlagen<\/p>\n
-Isolation von DNA proben aus Pflanzenkl\u00e4ranlagen<\/p>\n
–\tQuantitative Nachweis mit quantitiver PCR von des Antibiotikaresistenzgenen qnr<\/p>\n
–\tIsolation und molekularbiologische Charakterisierung von Chinolon-resistenten bakteria aus Pflanzenklaranlagen<\/p>\n
Verbleib von Antibiotikaresistenzgenen in Pflanzenkl\u00e4ranlagen<\/p>\n
1.Vorwort.<\/p>\n
Die in der letzten Zeit durchgef\u00fchrten Untersuchungen zeugen von Durchdringen der arzneiresistenten Bakterien in die Umwelt. Haupts\u00e4chlich dringen die Antibiotika in die Umwelt mit den Abw\u00e4ssern durch. Jahr f\u00fcr Jahr erh\u00f6ht sich der Antibiotikaverbrauch in der Welt. Die Bakterien haben sich ein Immunsystem gegen Pharmazeutika in der Umwelt entwickelt, und n\u00e4mlich z.B. Antibiotikaresistenz.<\/p>\n
2.Ziel.<\/p>\n
Ziel unserer Untersuchung war die Entdeckung der antibiotikaresistenten Bakterien und Genen. Die Untersuchungen wurden zwecks Entdeckung von gegen Chinolone resistenten Genen gef\u00fchrt. Wir wollten vor allen das qnrS Gen entdecken, das mit der Resistenz durch Ciprofloxacin verbunden ist.<\/p>\n
3.Methoden und Techniken.<\/p>\n
Die entnommenen Proben stammten von Pflanzenkl\u00e4ranlage in Langenreichenbach in Deutschland. Untersuchungmateriall wurde auf M\u00fcller-Hinton-Agar vorbereitet. Weiterhin wurden die Petrieschalen im Inkubator 24 Stunden bei 35 Grad aufbewahrt. Nach der Inkubation hat man die DNA abgesondert.Das wie oben beschrieben vorbereitete Material konnte weiter untersucht werden. Um die Gene zu entdecken mussten wir die PCR Methode anwenden. Die PCR Methode folgt auf Absonderung der DNA-Fragmente und M\u00f6glichkeit der Feststellung ihrer L\u00e4nge. Die Entdeckungen der gegebenen Kette in der untersuchten Probe ist auch m\u00f6glich. Bei der PCR Untersuchungen haben wir folgendes genutzt: GoTaq\u00ae Green Master Mix und die Primer in entsprechenden Ketten. Zur Elektrophorese hat man das Agarose-Gel 1,5% genutzt. Nach Elektrophorese wurde das Gel in Ethidiumbromid platziert und weiter hat man die Visualisierung der Ergebnisse gefertigt. Dank dem Produkt aus PCR konnten wird klonen um den Standard des qnrS Gens zur qPCR Untersuchung durchzuf\u00fchren.<\/p>\n
4.Ergebnisse.<\/p>\n
Es wurden drei Gene entdeckt : qnrC, qnrD, qnrS. Unser Interesse lag bei qnrS Gen, das direkt mit der Resistenz auf Ciprofloxacin verbunden ist. Das wurde in den Protokollen aus Faulbeh\u00e4lter entdeckt.
Das Klonen verlief erfolgreich. Dank dem Produkt aus PCR haben wir den Standard zur Quantitativuntersuchung qPCR gesetzt. <\/p>\n
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